利用微核技术初步探究生活污水排放对锦江河的污
染情况
生物科学与化学系 08生本班 刘胜梅
摘要：初步应用蚕豆根尖细胞微核试验监测生活污水排放对锦江污染程度，结果表明上游河段农业区水样导致的微核明显比市区河段水样导致的微核少，表明锦江水受生活污水排放有一定影响，并就锦江水资源保护及污染控制提出了若干建议。
关键词：微核试验；锦江；生活污水；水质污染
锦江是本区境内最大河流。锦江流域是本地区经济、文化、交通较发达的地方【1】。流域内总人口为52．2万人，耕地44．3万亩，而且鱼类资源丰富，同时锦江还是国家级旅游风景区【2】。因此，对锦江河水污染的研究十分必要，对铜仁发展和市民健康意义重大。
1 材料与方法
1．1 试验材料
铜仁学院遗传学实验室提供的蚕豆
1．2 试验方法
1．2．1 采样点的布置与水样的采集
2010年11月9日上午于锦江河清水塘段，锦江河铜仁学院段铜仁学院学生宿舍污水排放口下游约2m处和花果山段生活污水排放口下游约2m处分别采集水样各1500mL。编号清水塘母液，学院母液和花果山母液。 1．2．2 微核试验【5】
选种：在铜仁学院遗传学实验室提供的蚕豆中选取饱满 色泽较好的90粒
催芽：将选好的90粒蚕豆置于白磁盘中加入适量蒸馏水（水刚好浸没蚕豆），放入恒温光照培养箱中23．9度催芽48h，期间换水2次。
处理液配置：将花清水塘母液取出200mL稀释成1/5的稀释液，取花果山母液200mL稀释成1/5的稀释液。将学院母液200mL稀释成1/5的稀释液。
处理：用被检测液处理根尖，每一处理选取9粒初生根尖生长良好，分别放入盛有被检测液的3个培养皿中，被检测液浸泡根尖。同时，取另一组（3个）培养皿以蒸馏水处理根尖，作为对照。
处理时间约为72小时（此时间可根据实验要求和被检测液的浓度等情况而定）。
表一 蚕豆根尖的不同处理
培养皿编号 1 2
处理液 花果山母液 花果山母液 培养的蚕豆数目 3 3
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 花果山母液 花果山5倍稀释液 花果山5倍稀释液 花果山5倍稀释液 学院母液 学院母液 学院母液 学院5倍稀释液 学院5倍稀释液 学院5倍稀释液 清水塘母液 清水塘母液 清水塘母液 清水塘稀释5倍 清水塘稀释5倍 清水塘稀释5倍 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 取材、制片：将恢复培养后的种子从根尖顶端切下1cm长的幼根。制片时，用蒸馏水浸洗三次，每次3—5min，吸干，加入解离液（6mol/L的盐酸和95%酒精1:1混合液）浸没根尖酸解大约15min，幼根软化即可。吸去解离液，用蒸馏水浸洗三次，每次1-2min，最后浸入水中；取根置于载玻片上，截下1-2mm长的根尖，滴一滴龙胆紫染液，染色10—15min，压片观察。
镜检与结果分析: 在低倍镜下找到分生组织区分散均匀的部位，再转高倍镜下观察。微核大小在主核1/3以下，并与主核分离，着色与主核一致，呈近椭圆形。 观察并统计微核的千分率，以其作为指标按下述公式测出水样的污染指数： 污染指数=样品实测微核的千分率/对照组微核的千分率
2 结果与分析
本实验对锦江河市区段的两个采样点的微核千分率和污染指数进行了测定，计算各采样点的微核千分率平均值，将各采样点微核千分率平均值与对照组进行比较，发现有显著差异（见表2）。而且市区花果山段和学院段河水的污染程度都很高，而城市的外围，清水塘处（上游）污染程度很小，说明生活污水的排放对锦江河有很大的影响。
表2【3】 各采样点微核千分率统计 （选现象较明显的组对照分析）
名称 处理 装片编号 1 微核千分率 5 平均微核千分率 污染指数（PI） 污染程度
蒸 馏 水 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0 6 4 5 17 19 20 14 17 16 14 12 14 13 8 9 9 9 8 5.00 学 院 母 液 17．40 3.5 重 花 果 山 母 液
清 水 塘 母 液
13.82 2.8 中 8.6 1.7 轻 3． 讨论及建议
3．1讨论
河流是人类最宝贵的一种自然资源，它为人类生存提供了稳定的水源和肥沃的土壤，最早的人类文明都是沿着河流和河谷发展起来的。由于人类活动排放的各种污染物进入河流，使河流水质和河流底泥的物理、化学性质或生物组成发生变化，从而降低了河流的使用价值，使河流失去了原有的意义。目前，河流污染主要包括氮磷等营养物和有机物污染两方面，污染源主要分为生活污水污染、工业污染以及农业污染三大类【4】。人们应当对水体中的污染物进行处理，从而使水体得到净化，使人类对河流环境的干扰降到最小，与自然共生存，为生物栖息和繁殖创造良好的生态环境，造福于子孙后
3．2建议
1、控制工业污染。严查沿河污染源，如工厂排污管。查到重处企业并对第一责任人追究法律责任。
2、控制生活废水污染。对各生活废水排污口统一规划，建立分布图，定期对出水口水污染程度进行监控。
3、政府行为。坚决落实国家环境保护法律，完善对工业污染企业及责任人的处罚要有文字文件或法规，不能以罚代法。即使罚，只能按污染程度（所以要有文字法规）进行处罚，还可以反推污染程度进行处罚，不能按企业好坏处罚，特别是小企业、小作坊。 4、完善城市污水处理体系。建立统一污水处理工厂。 5、加强对生产污染源企业的监督管理。
参考文献
【1】 ，来源不详
【2】 铜仁地区网站
【3】 李春喜，王志和，王文林。生物统计学（第二版）[M].北京：科学出版社，2000 【4】 维普网。深圳城市河流污染治理及生态恢复措施
【5】 刘祖洞。《遗传学实验》（第二版）。高等教育出版社，2010
实验照片
学校稀释五倍 学校稀释十倍
学校母液 学校母液
实验过程 实验过程
实验过程
花果山母液
花果山稀释十倍
花果山稀释五倍
花果山母液
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