HPLC检测茶叶中儿茶素单体方法优化

1)试剂

a. 甲醇（色谱纯） b. 冰醋酸（分析纯） c.甲酰胺（色谱纯天津科密欧） d. 纯净水 2)仪器

高效液相色谱仪（Shimadzu） 分析天平（1/10000） 超声波清洗仪 0.45 m 微孔过滤器 50 ml 容量瓶 带塞小玻璃瓶 3)色谱条件

色谱柱 Shim-pack ODS C18 5 m 4.6150 mm 波长 278 nm

流动相 A: 水 B: 甲酰胺:甲醇:冰醋酸=40:2:1.5（V/V/V） 流速 1.0 mL/min 进样量 10 L 梯度： Time %A %B 0.01 86 14 13 76 24 22 66 34 28 66 34 30 86 14 35 86 14 4)样品制备

（1） 待测样品 精确称取30 mg提取物于50 mL容量瓶中，用水超声溶解，

冷却定容，0.45 m微孔滤膜过滤为供试液。

若为原料，精确称取3.0g原料于椎形瓶中，加入450 mL沸水（蒸馏水），于水浴锅中煮45 min，每隔10 min摇动一次，用棉花进行粗滤至500 mL的容量瓶中，冷却定容，用滤纸精滤，0.45 mm微孔滤膜过滤，取10 L滤液上HPLC分析。

(2) 标样制备 精密称取各标准品适量用水溶解，过0.45m滤膜，置冰箱

贮存，备用。

5)计算

根据各峰峰面积利用外标法计算各种成份的含量。

备注：出峰顺序依次为CAF、EGC、DL-C、EC、EGCG、GCG、ECG

Detector A (278nm)CatechinCatechin011.datEGCG0.25Retention TimeName0.250.20CAF19.801 0.200.157.220 0.15EGCDL-CECGCG 10.4320.00051015Minutes13.743 0.0518.46324.108 28.6100.10ECG0.10 0.050.00202530 Detector A (278nm)CatechinCatechin235.dat0.25Retention TimeName0.25EGCG0.156.773 0.20CAF0.200.15 18.058GCG22.2270.10ECG 0.10DL-CEGC0.000.02.55.07.510.012.515.0Minutes9.42312.39716.805 0.05 EC26.355 0.05 0.0017.520.022.525.027.530.0